短发卡RNA对人胃癌细胞STAT3基因的沉默作用

作     者：童强 舒晓刚 卢晓明 黎维勇 陶凯雄 陈道达 王国斌 TONG Qiang;SHU Xiaogang;LU Xiaoming;LI Weiyong;TAO Kaixiong;CHEN Daoda;WANG Guobin

作者机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院胃肠外科湖北武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院药剂科湖北武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院腔镜外科湖北武汉430022 

基　　金：湖北省科技攻关计划课题资助(2006AA301A05) 

出 版 物：《中国普通外科杂志》 (China Journal of General Surgery)

年 卷 期：2008年第17卷第5期

页      码：462-465页

摘      要：目的探讨STAT3基因小发夹RNA(shRNA)表达质粒对胃癌MKN-45细胞STAT3基因的干扰作用。方法根据STAT3 mRNA编码序列,设计RNA干扰靶点,构建STAT3基因的特异性小RNA干扰质粒(psiRNA-H1/STAT3),使用脂质体转染人胃癌细胞系(MKN-45细胞)。实验分为对照(A)组,psiRNA-H1转染(B)组和psiRNA-H1/STAT3转染(C)组。通过RT-PCR和Western Blot检测STAT3特异性小RNA干扰基因对胃癌细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达的影响。结果psiRNA-H1/STAT3经限制性酶切及部分序列分析证明基因插入正确,并经测序证实。将其成功转染MKN-45细胞后,该细胞的STAT3 mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.05)。结论将成功构建的针对STAT3基因的shRNA表达载体转染MKN-45细胞,能有效抑制该细胞的STAT3 mRNA和蛋白表达,为STAT3基因靶向治疗提供一定的实验依据。

主 题 词：胃肿瘤 STAT3转录因子 RNA干扰 基因表达 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-6947.2008.05.016

馆 藏 号：203115811...