非洲猪瘟病毒p54蛋白的截短表达及其单克隆抗体的制备

作     者：郑南南 东梦珂 吴宏举 侯浩宇 陈寅龙 李潮 赵慧君 张改平 杜永坤 ZHENG Nannan;DONG Mengke;WU Hongju;HOU Haoyu;CHEN Yinlong;LI Chao;ZHAO Huijun;ZHANG Gaiping;DU Yongkun

作者机构：河南农业大学动物医学院国家动物免疫学国际联合研究中心河南郑州450046 

基　　金：国家自然科学基金专项资助项目(31941001) 河南省高等学校重点科研资助项目(21A230010) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2022年第42卷第11期

页      码：2139-2144页

摘      要：非洲猪瘟在我国首次暴发至今已经3年多,给我国养猪业及其相关产业带来了严重的损失。本试验主要以非洲猪瘟病毒E183L基因编码的p54蛋白为研究对象,设计扩增截短E183L基因的引物,构建p54蛋白重组表达载体pET-28a(+)-p54,转化至感受态细胞BL21(DE3)中进行诱导表达,获得可溶性表达的重组p54蛋白,通过Ni柱得到良好纯化。之后免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾脏与骨髓瘤细胞融合制备单克隆抗体,通过ELISA方法筛选和3次亚克隆共制备出2株能稳定分泌针对ASFV p54蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株。经ELISA测定抗体腹水效价在1∶100000~1∶1000000之间。Western blot检测表明单克隆抗体与p54蛋白能够特异性反应。经鉴定2株单克隆抗体亚型均为IgG2b,κ。该研究获得的单克隆抗体将为p54蛋白的生物学功能的研究和ASFV血清学检测奠定基础。

主 题 词：非洲猪瘟病毒 p54蛋白 原核表达 单克隆抗体 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.11.03

馆 藏 号：203115939...