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实时荧光PCR技术快速检测食品中的蜡样芽孢杆菌

实时荧光PCR技术快速检测食品中的蜡样芽孢杆菌

作     者:马琳琳 刘珍 马腾州 清江 田衍香 丁利 MA Linlin;LIU Zhen;MA Tengzhou;QING Jiang;TIAN Yanxiang;DING Li

作者机构:长沙理工大学化学与食品工程学院长沙410114 长沙和合医学检验实验室有限公司长沙410000 上海海关工业品与原材料检测技术中心上海200135 

基  金:国家重点研发计划(2017YFF0211204,2016YFF0103800) 长株潭国家自主创新示范区专项(2018XK2006-1) 

出 版 物:《理化检验(化学分册)》 (Physical Testing and Chemical Analysis(Part B:Chemical Analysis))

年 卷 期:2022年第58卷第12期

页      码:1461-1465页

摘      要:以蜡样芽孢杆菌gyrB基因作为目标基因并设计特异性引物,用95℃预变性5 min、95℃变性15 s、50℃复性30 s、72℃延伸30 s,反应45个循环为反应程序,以蜡样芽孢杆菌DNA为模板进行荧光定量聚合酶链式反应(PCR),提出了食品中蜡样芽孢杆菌快速检测的方法,并对该方法特异性、蜡样芽孢杆菌DNA灵敏度以及活菌检出限进行验证。结果表明,该引物在分段扩增中可以实现对蜡样芽孢杆菌的快速检测,而且重复性好;以3种非蜡样芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌进行特异性试验,非蜡样芽孢杆菌均没有扩增出曲线,仅蜡样芽孢杆菌扩增出特异性曲线;蜡样芽孢杆菌DNA按10倍稀释法进行灵敏度检测,可达0.01 mg·L^(-1),活菌检出限为8.9×10^(2)CFU·mL^(-1)。

主 题 词:蜡样芽孢杆菌 荧光定量聚合酶链式反应(PCR) gyrB基因 食品 

学科分类:081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 070302[070302] 0703[理学-化学类] 

D O I:10.11973/lhjy-hx202212016

馆 藏 号:203115991...

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