V3环缺失的HIV-1 ADA株包膜表达载体构建及鉴定

作     者：李妍 周海舟 服部俊夫 凌虹 

作者机构：哈尔滨医科大学微生物学教研室 日本东北大学大学院医学系研究科感染症呼吸病态学分野 哈尔滨医科大学寄生虫学教研室黑龙江哈尔滨150086 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30170817 30471608) 黑龙江省教育厅海外学人资助项目(1053H013) 

出 版 物：《哈尔滨医科大学学报》 (Journal of Harbin Medical University)

年 卷 期：2005年第39卷第3期

页      码：208-210页

摘      要：目的构建V3环缺失的HIV1ADA株包膜糖蛋白表达体系。方法分别设计包膜糖蛋白两端及V3环两端的两对引物,采用重叠延伸剪接法,进行HIV1ADA株包膜糖蛋白V3环缺失体的构建。得到的PCR产物经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,与pSM载体连接,构建HIV1ADA株包膜糖蛋白V3环缺失的表达载体(pSMADAΔV3),转化大肠杆菌后筛选阳性克隆,经PCR及基因序列测定进行鉴定。结果获得HIV1ADA株包膜糖蛋白V3环缺失体PCR产物,构建了其表达载体pSMADAΔV3,经转化和筛选获得了重组菌,经PCR及基因测序结果显示重组质粒序列正确,为预期目的片段。结论成功构建了V3环缺失的HIV1ADA株包膜糖蛋白的表达载体。此结果为进一步构建伪病毒,观察V3环完全或部分缺失对病毒侵入靶细胞过程的影响,为开发阻止HIV1进入靶细胞的药物或疫苗打下基础。

主 题 词：HIV-1 V3环 缺失 重叠延伸剪接法 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-1905.2005.03.002

馆 藏 号：203116226...