AFP基因shRNA表达质粒稳定转染肝癌细胞克隆的构建

作     者：董天皞 李晓丹 倪虹 Dong Tianhao;Li Xiaodan;Ni Hong

作者机构：南开大学生命科学学院天津300071 南开大学医学院天津300071 

基　　金：天津市科委资助项目(05gfjmjc08100) 

出 版 物：《南开大学学报（自然科学版）》 (Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Nankaiensis)

年 卷 期：2006年第39卷第5期

页      码：58-62页

摘      要：甲胎蛋白(AFP)是一种重要的胚胎期及肝癌相关蛋白,为了深入研究其在肝癌细胞增殖中的作用,构建了针对AFP基因的shRNA表达质粒,拟建立可稳定转染的肝癌细胞克隆;利用生物信息学方法设计shRNA,经酶切连接和抗生素筛选构建表达质粒;通过酶切、琼脂糖凝胶电泳及测序对质粒加以验证;优化转染条件后采用脂染法转染肝癌SMM C-7721细胞,利用Purom yc in筛选稳定转染的细胞克隆.成功获得高特异的shRNA设计结果,构建了针对人类AFP基因的shRNA表达质粒,并获得该质粒稳定转染的细胞克隆.

主 题 词：甲胎蛋白 RNA干扰 短发卡RNA 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.0465-7942.2006.05.013

馆 藏 号：203116269...