乳牛子宫内膜抗菌肽BNBD5基因的克隆及其原核表达

作     者：王桂荣 严作廷 王东升 米宝明 崔燕 WANG Gui-rong;YAN Zuo-ting;WANG Dong-sheng;MI Bao-ming;CUI Yan

作者机构：甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所甘肃兰州730050 

基　　金：中央级科研单位基本科研业务费项目(BRF070305) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2009年第39卷第6期

页      码：538-542页

摘      要：为研发防治乳牛子宫内膜炎的抗菌肽生物制剂,根据已发表的牛抗菌肽基因序列设计了1对引物,用试剂盒提取乳牛新鲜子宫内膜总RNA,经RT-PCR扩增,将克隆的抗菌肽BNBD5基因全长编码区的cDNA连接到原核表达载体pET30a中,经IPTG诱导原核表达,通过Western-blot检测融合蛋白BNBD5的表达水平。结果表明,RT-PCR扩增出的cDNA片段长138 bp,编码45个氨基酸的多肽,多肽中含6个保守半胱氨酸残基。用Blast程序进行检索比较显示,克隆出了牛防御素家族成员BNBD5基因,并成功构建了pET30a-BNBD5载体,经IPTG诱导,pET30a-BNBD5原核表达产物的相对分子质量约为10 ku,与预期的融合蛋白大小一致,证实构建的重组质粒能够在大肠杆菌中表达。

主 题 词：乳牛 子宫内膜抗菌肽 BNBD5基因 克隆 原核表达 

学科分类：090603[090603] 0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-4696.2009.06.013

馆 藏 号：203116367...