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B6-Co小鼠Ankrd55和Ddx4突变候选基因克隆及测序

B6-Co小鼠Ankrd55和Ddx4突变候选基因克隆及测序

作     者:李瑶 吴刘成 卢泽艳 郑良凤 葛良玉 邵义祥 LI Yao;WU Liu-cheng;LU Ze-yan;ZHENG Liang-feng;GE Liang-yu;SHAO Yi-xiang

作者机构:南通大学实验动物中心南通226001 南通大学比较医学研究所南通226001 

基  金:国家自然科学基金项目(30671081) 江苏省自然科学基金项目(BK2010279) 南通大学自然科学基金项目(112052) 

出 版 物:《实验动物与比较医学》 (Laboratory Animal and Comparative Medicine)

年 卷 期:2012年第32卷第5期

页      码:371-375页

摘      要:目的对B6-Co小鼠Ankrd55和Ddx4基因进行克隆测序分析,寻找是否存在突变位点。方法以小鼠Ankrd55和Ddx4基因的mRNA序列设计引物,以mRNA为模板,采用RT-PCR和PCR技术分段进行目的基因扩增,将目的片段连接在T载体上,转化至感受态细胞,筛选阳性克隆,提取质粒DNA分子,电泳检测,EcoRE酶切释放目的片段,测序、分析、比对。结果Ddx4基因位于小鼠13号染色体第113412349的碱基由c转换成A,导致编码氨基酸的密码子改变,产物脯氨酸(P)变成谷氨酰胺(Q)。结论Ddx4基因发生单碱基突变,表明该突变可能与B6-co小鼠的EOB表型相关,但是有待于进一步研究。

主 题 词:B6-Co小鼠 角膜混浊 PCR体外扩增:基因克隆 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 100212[100212] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1674-5817.2012.05.001

馆 藏 号:203116519...

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