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有效PGK1短发夹RNA序列的筛选

有效PGK1短发夹RNA序列的筛选

作     者:丁浩 成宜军 肖红 阎华 张锐 章文斌 张岩松 邹元杰 刘宏毅 

作者机构:南京医科大学附属脑科医院神经外科江苏省210029 南京医科大学附属脑科医院研究所江苏省210029 

基  金:国家自然科学基金(NSFC81172390) 南京市医学科技发展项目(ZKX10021) 

出 版 物:《江苏医药》 (Jiangsu Medical Journal)

年 卷 期:2013年第39卷第16期

页      码:1861-1864页

摘      要:目的筛选有效抑制磷酸甘油酸激酶1(PGK1)基因的短发夹核糖核酸(shRNA)序列。方法针对PGK1的不同基因区域设计4个shRNA序列,应用LipofectamineTM2000方法转染至胶质瘤细胞株U251细胞,荧光显微镜下观察shRNA的转染效率。采用RT-PCR方法检测PGK1的mRNA表达,Western blot方法检测PGK1的蛋白表达。结果针对PGK1-homo-441位点的shRNA4(5′-GCAAGGATGTTCTGTTCTTGA-3′)能更有效地抑制PGK1的mRNA及蛋白表达。结论shRNA4是能有效抑制PGK1表达的序列,可用于PGK1的功能研究。

主 题 词:短发夹核糖核酸 磷酸甘油酸激酶1基因 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100204[100204] 10[医学] 

D O I:10.19460/j.cnki.0253-3685.2013.16.001

馆 藏 号:203116556...

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