鼠疫耶尔森氏菌YopD抗原基因在大肠杆菌中的克隆表达

作     者：郭荣 申小娜 李博 陈艳 张渝疆 GUO Rong;SHEN Xiaona;LI Bo;CHEN Yan;ZHANG Yujiang

作者机构：新疆医科大学乌鲁木齐830011 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心乌鲁木齐830002 中国疾病预防控制中心北京102206 

基　　金：国家自然科学基金(30960348) 

出 版 物：《新疆医科大学学报》 (Journal of Xinjiang Medical University)

年 卷 期：2014年第37卷第3期

页      码：284-286,291页

摘      要：目的利用DNA重组技术,在大肠杆菌中获得融合表达的鼠疫耶尔森氏菌YopD抗原基因。方法根据查找文献及基因比对选取了鼠疫菌重要功能蛋白-YopD蛋白。利用分子克隆技术克隆后,在原核系统中进行表达。根据云南玉龙菌株(D106004)全基因组序列设计引物,PCR扩增目的基因片段。采用pET-32a(+)作为表达载体,通过双酶切和连接反应,将目的基因片段定向插入载体中,构建重组表达质粒。IPTG诱导,使重组质粒在其宿主菌*** BL21(DE3)中表达。结果在大肠杆菌中成功获得了融合表达蛋白,即重组YopD蛋白。结论以质粒pET-32a(+)作为表达载体,鼠疫菌重要功能蛋白YopD能够在大肠杆菌*** BL21(DE3)中稳定高效地表达,为鼠疫潜在诊断靶点及新型疫苗选择的可能性奠定了基础。

主 题 词：鼠疫耶尔森氏菌 YopD抗原基因 克隆表达 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-5551.2014.03.009

馆 藏 号：203116577...