细菌性肺炎快速诊断基因芯片的初步构建

作     者：董进浪 李华 汪健 王小中 胡晓彦 曾林祥 

作者机构：烟台市莱阳中心医院检验科山东莱阳265000 南昌大学第二附属医院江西南昌330006 

基　　金：江西省卫生厅基金资助项目(20061079) 

出 版 物：《中国实验诊断学》 (Chinese Journal of Laboratory Diagnosis)

年 卷 期：2014年第18卷第7期

页      码：1048-1052页

摘      要：目的根据细菌16SrRNA基因特点设计常见病原菌的特异性探针,采用酶显色技术构建基因芯片,探讨其临床应用的可能性。方法选取肺炎链球菌、流感嗜血杆菌及铜绿假单胞菌等8种细菌性肺炎常见的病原菌的标准菌株作为研究对象,并选择12份患者的痰液标本进行检测。在16SrRNA基因保守区设计PCR反应的通用引物及革兰阳性菌、革兰阴性菌的通用探针,利用可变区的差异设计合成特异性探针,构建基因芯片。利用细菌16S rRNA基因设计的PCR通用引物进行扩增,所有8种细菌均获得350bp的扩增产物。以地高辛标记特异性探针,构建完成可用于8种常见病原菌检测的基因芯片,结果 8种标准菌株基因芯片检测均取得了预期效果,对12份痰标本中常规培养阳性7份,其对应芯片检测结果均成阳性,5份常规培养阴性的标本中,芯片结果提示阳性的有3份,其中1份为嗜肺军团菌,2份为使用抗生素后的患者标本。结论设计合成的PCR通用引物对扩增细菌的16SrRNA基因具有较高的特异性及灵敏度。构建的基因芯片可用于常见细菌性肺炎病原菌的检测鉴定,且对抗生素使用后的临床标本及苛养菌有一定的诊断价值。本研究所获得基因芯片对于细菌性肺炎的检测具有简单、快速、特异性及敏感性高的特点。

主 题 词：16SrRNA 基因芯片 细菌性肺炎 

学科分类：100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 10[医学] 

馆 藏 号：203116610...