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上皮生长因子受体外显子21基因突变L858R的实时定量PCR检测

上皮生长因子受体外显子21基因突变L858R的实时定量PCR检测

作     者:董强刚 李建璋 黎飒 刘刚 苏建中 贯剑 DONG Qiang-gang;LI Jian-zhang;LI Sa;LIU Gang;SU Jian-zhong;GUAN Jian

作者机构:上海交通大学肿瘤研究所 上海奇诺肿瘤生物高新技术有限公司上海200032 上海奇诺肿瘤生物高新技术有限公司 

基  金:2005年上海市引进技术的吸收与创新计划(编号:05PTYY-12) 

出 版 物:《肿瘤》 (Tumor)

年 卷 期:2007年第27卷第2期

页      码:150-154页

摘      要:目的应用实时定量PCR技术建立上皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)外显子21基因突变L858R的检测新方法。方法根据Taqman-MGB原理设计野生型外显子21和L858R特异性探针,经过优化制备成试剂盒检测171例肺癌组织中的L858R基因突变,并将结果与基因测序进行对比分析。结果171例肺癌组织经基因测序共检出L858R突变15例,突变率为8.8%。突变多见于女性、肺腺癌及腺鳞癌。定量PCR检测显示,15例突变型组织的R值平均为0.840±0.223,而156例野生型组织的R值平均为1.552±0.278,两组间差异具有统计学显著意义(P<0.001)。此外,以突变型为主的肺癌组织其R值(0.613±0.137)显著低于野生型占优势组织(0.992±0.103),两组间差异极为显著(P<0.001)。实验证明,定量PCR检测方法对L858R基因突变具有高度特异性,其最低检测限度为突变型DNA占野生型DNA含量的12.5%。结论本方法检测EGFR基因L858R突变具有敏感性高、特异性好、简便快速等优点,应用本方法不仅可以对野生型EGFR外显子21或突变型L858R进行诊断,而且还可以根据R值判断样本中突变型基因的比例。

主 题 词:肺肿瘤 癌,非小细胞肺 受体,表皮生长因子 DNA突变分析 试剂盒,诊断 分子诊断技术 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3781/j.issn.1000-7431.2007.02.017

馆 藏 号:203116763...

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