基于DNA条形码和特异性PCR技术鉴别蚂蟥及其常见伪品

作     者：解盈盈 李军 汪冰 于雅萌 栾永福 梅桂雪 张全芳 戴忠 林永强 Xie Yingying;Li Jun;Wang Bing;Yu Yameng;Luan Yongfu;Mei Guixue;Zhang Quanfang;Dai Zhong;Lin Yongqiang

作者机构：山东省食品药品检验研究院国家药监局胶类产品质量评价重点实验室山东省中药标准创新与质量评价工程实验室济南250101 山东省农业科学院生物技术研究中心应用生命科学实验室济南250101 中国食品药品检定研究院北京100050 

基　　金：山东省重点研发计划重大科技创新工程项目(编号2021CXGC010511) 山东省重点研发计划项目(编号2020RKB24001) 山东省人文社会科学课题(编号2021-YYGL-44) 

出 版 物：《中国药事》 (Chinese Pharmaceutical Affairs)

年 卷 期：2023年第37卷第1期

页      码：48-58页

摘      要：目的:建立蚂蟥特异性PCR鉴别方法,能够快速准确地鉴别蚂蟥与其常见伪品。方法:通过分析蚂蟥与其常见伪品的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)序列,寻找蚂蟥SNP变异位点,设计特异性引物;通过对退火温度、循环次数、DNA模板量及Taq酶等关键因素的考察,确立最优反应体系及条件,并将特异性PCR方法应用到水蛭(蚂蟥)粉末中进行药材粉末的基原鉴别,同时为保证试验结果的准确性,将PCR扩增产物进行一代测序。结果:特异性PCR结果表明蚂蟥在400~600 bp有单一明亮条带,常见混伪品则无此条带,试验结果与一代测序结果一致,为蚂蟥。结论:该方法能够将蚂蟥与其常见伪品菲牛蛭、东北小水蛭、黑条、小黑条等区别,且能鉴别水蛭(蚂蟥)粉的基原,为提升中药监管力度,打击中药掺伪行为提供了强有力的技术支持。

主 题 词：DNA条形码 聚合酶链式反应(PCR)法 蚂蟥 混伪品 蚂蟥粉 

学科分类：1007[医学-药学类] 100704[100704] 10[医学] 

D　O　I：10.16153/j.1002-7777.2023.01.006

馆 藏 号：203116806...