一种基于流式细胞仪平台荧光共振能量转移技术的Caspase-8活性检测荧光探针

作     者：陈典华 华子春 CHEN Dian-hua;HUA Zi-chun

作者机构：南京大学生命科学学院、南京大学医药生物技术国家重点实验室江苏南京210093 

基　　金：国家科技部纳米重大研究计划资助项目(2011CB933502) 干细胞重大研究计划资助项目(2012CB967004) 江苏省科技支撑计划资助项目(BE2013630) 常州市科技支撑计划资助项目(CE20135013) 

出 版 物：《药学学报》 (Acta Pharmaceutica Sinica)

年 卷 期：2015年第50卷第3期

页      码：291-297页

摘      要：荧光共振能量转移技术(fluorescence resonance energy transfer,FRET)作为一种经典的荧光检测技术,已经广泛运用于生物科学研究中,开发了一系列基于FRET技术的荧光检测探针。半胱氨酸蛋白酶家族(cysteine aspartic acid specific protease,Caspase)在细胞凋亡通路中发挥着十分重要的作用,尤其是位于死亡受体介导的凋亡通路起始位置的Caspase-8,它的激活能引发后续的一系列Caspase酶原的激活并引起细胞的凋亡。因此,Caspase-8活性的检测在细胞凋亡检测中具有非常重要的意义。本文基于蛋白酶类FRET荧光探针原理设计了一个能检测活细胞内Caspase-8活性变化的荧光探针,并且在流式细胞仪上利用FRET技术检测了细胞凋亡诱导剂特异性激活的Caspase-8活性,从而证明了所构建的探针检测Caspase-8活性的有效性和特异性。结果表明,所设计的探针能够特异性地响应细胞凋亡诱导中引起细胞内Caspase-8酶活性的变化,并且能够利用流式细胞技术得以快速定量检测。本研究为在活细胞中检测Caspase-8活性提供了一种更加方便快捷的检测方法。

主 题 词：荧光共振能量转移技术 细胞凋亡 Caspase-8 荧光探针 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 1006[医学-中西医结合类] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 100706[100706] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16438/j.0513-4870.2015.03.001

馆 藏 号：203117322...