靶向切割猪Y染色体的CRISPR/Cas9载体构建及功能验证

作     者：霍梦飞 孟繁明 王塑天 李颢 杨化强 HUO Mengfei;MENG Fanming;WANG Sutian;LI Hao;YANG Huaqiang

作者机构：国家生猪种业工程技术研究中心/华南农业大学动物科学学院广东广州510642 广东省农业科学院动物科学研究所/畜禽育种国家重点实验室/广东省畜禽育种与营养研究重点实验室广东广州510640 

基　　金：广东省基础与应用基础研究基金(2019B1515210030) 广东省科技计划重点领域研发计划(2018B020203002) 

出 版 物：《华南农业大学学报》 (Journal of South China Agricultural University)

年 卷 期：2023年第44卷第2期

页      码：187-196页

摘      要：【目的】通过CRISPR/Cas9系统对Y染色体多位点切割,实现目标染色体的敲除,为畜禽性别控制提供新的手段。【方法】以CRISPR/Cas9技术为基础,寻找Y染色体上能被sgRNA特异性识别的多拷贝重复序列,并通过体外切割、定量分析、核型鉴定验证其对靶点的有效性。【结果】所设计的sgRNA能够在体外实现对靶片段的明显切割,且切割效率均达到了50%以上。基因的定量分析结果证明了其在细胞水平切割的有效性,且簇状重复序列切割效果明显优于散在重复序列;核型鉴定结果证实了细胞水平猪Y染色体的丢失。【结论】研究结果为后续构建染色体敲除猪,实现猪的性别控制奠定了基础。

主 题 词：猪 CRISPR/Cas9 Y染色体 性别控制 基因编辑 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 0905[农学-林学类] 09[农学] 071007[071007] 0836[0836] 090501[090501] 

核心收录：

D　O　I：10.7671/j.issn.1001-411X.202201022

馆 藏 号：203117909...