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猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒4型双重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒4型双重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者:张远航 董新莹 张玉勤 刘晓晨 李洪炫 陈曦艋 潘佳佳 陈红英 ZHANG Yuanhang;DONG Xinying;ZHANG Yuqin;LIU Xiaochen;LI Hongxuan;CHEN Ximeng;PAN Jiajia;CHEN Hongying

作者机构:河南农业大学动物医学院河南郑州450002 

基  金:河南省科技攻关资助项目(222102110375) 河南省高校科技创新人才支持计划资助项目(21HASTIT039) 河南农业大学青年英才资助项目(30500635) 

出 版 物:《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期:2022年第42卷第11期

页      码:2158-2163页

摘      要:分别靶向PRRSV ORF7基因和PCV4 ORF2基因的高度保守区,设计了2对特异性引物,建立了同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒4型(PCV4)的SYBR GreenⅠ-based双重实时荧光定量PCR方法。PRRSV和PCV4在同一样品中的区别在于它们独特的熔解温度(T_(m)),PRRSV为84.5℃,PCV4为79.0℃,而对其他非靶向的猪常见病毒没有显示特定的熔解峰,且检测极限分别为PRRSV的81.5 copies/μL和PCV4的41.1 copies/μL。采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR和常规PCR方法对30例有呼吸和繁殖衰竭症状的猪临床样本进行检测,检测结果显示,PRRSV阳性率为20.0%(6/30),PCV4阳性率53.3%(16/30),且PRRSV阳性样品中PCV4检出率为50.0%(3/6),较常规PCR检测更灵敏。该方法可能是检测PRRSV和PCV4共感染的一种快速、灵敏和可靠的方法。

主 题 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒4型 实时荧光定量PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.11.06

馆 藏 号:203117927...

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