利用正交设计优化茶树ISSR反应体系

作     者：卢莉 张强 王玉花 房婉萍 崔清梅 袁程晓 黎星辉 LU Li;ZHANG Qiang;WANG Yu-hua;FANG Wan-ping;CUI Qing-mei;YUAN Cheng-xiao;LI Xing-hui

作者机构：南京农业大学茶叶科学研究所江苏南京210095 恩施州农业科学院茶叶研究所湖北恩施445000 

基　　金：江苏省科技攻关计划(BE2009 BE2008320-2) 苏州市农业科技攻关计划(SNG0904 SNG0926 SNG0809 WNZ0802) 国家自然科学基金(30800884) 现代农业产业技术体系建设专项资金资助 

出 版 物：《经济林研究》 (Non-wood Forest Research)

年 卷 期：2010年第28卷第1期

页      码：14-19页

摘      要：为优化茶树ISSR分子标记反应体系,对影响茶树ISSR反应较大的Mg2+浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度5个因素在4水平上进行优化试验,建立了适合于茶树ISSR-PCR(Inter Simple Sequence Repeats-Polymerase Chain Reaction)的最佳体系:20μL反应体系中,TaqDNA聚合酶0.75U/μL,10×buffer(含Mg2+)2.0mmol·L-1,模板DNA20ng,dNTP0.1mmol·L-1,引物0.3μmol·L-1。反应程序为:94℃预变性5min,94℃变性1min,50～60℃退火40s,72℃延伸90s,34次循环,72℃延伸7min,4℃保存。

主 题 词：茶树 ISSR 正交设计 反应体系 

学科分类：09[农学] 090203[090203] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1003-8981.2010.01.003

馆 藏 号：203117943...