TAFA2基因剔除小鼠模型的建立

作     者：孙莲花 陈燕 麻孙恺 迟俊 匡颖 顾鸣敏 王铸钢 SUN Lian-hua;CHEN Yan;MA Sun-kai;CHI Jun;KUANG Ying;GU Ming-min;WANG Zhu-gang

作者机构：上海交通大学医学院医学遗传学教研室上海200025 上海南方模式生物研究中心上海201210 

基　　金：本课题受国家科技支撑计划(2006BAI23B02)和上海市科委实验动物研究项目(091409034000)资助 

出 版 物：《实验动物与比较医学》 (Laboratory Animal and Comparative Medicine)

年 卷 期：2010年第30卷第5期

页      码：322-328页

摘      要：目的 建立TAFA2基因剔除小鼠模型,为在体研究TAFA2基因的生物学功能及其与中枢神经系统发生、发育的关系创造条件. 方法 运用生物信息学手段确定小鼠TAFA2基因组的序列,设计基因剔除策略,构建基因剔除载体pBR322-MK-MCS-TAFA2,以电穿孔方法将基因剔除载体导入ES细胞,用G418和Ganciclovoir进行正负筛选,获得双抗性克隆,PCR鉴定出正确同源重组的ES细胞克隆. 结果 同源重组的ES细胞注入小鼠囊胚后获得嵌合体小鼠,嵌合体小鼠与C57BL/6J小鼠交配后获得Aguoti（野生型）毛色的小鼠41只,其中14只为TAFA2基因剔除杂合子小鼠,阳性率为34.1%.在雌、雄杂合子小鼠交配的后代中获得纯合子小鼠,初步的表型观察未发现TAFA2基因剔除小鼠出现异常改变. 结论 已成功建立了TAFA2基因剔除小鼠模型,其中纯合子小鼠未出现胚胎致死现象.

主 题 词：TAFA2基因 脑组织特异表达基因 基因剔除 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071002[071002] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-5817.2010.05.003

馆 藏 号：203117967...