靶向人类白细胞抗原G1(HLA-G1)的siRNA真核表达载体的构建及表达

作     者：李会俭 刘学渊 顾蔚蓉 李笑天 Hui-jian LI;Xue-yuan LIU;Wei-rong GU;Xiao-tian LI

作者机构：复旦大学附属妇产科医院上海200011 

基　　金：上海市自然科学基金资助项目 项目号:10ZR1404900 

出 版 物：《生殖与避孕》 (Reproduction and Contraception)

年 卷 期：2011年第31卷第11期

页      码：725-730页

摘      要：目的:构建靶向人类白细胞抗原G1(HLA-G1)的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体(pSUPER-HLA-G1),并检测其在滋养细胞系HTR-8/SVneo中的敲减效率。方法:将设计的HLA-G1 siRNA寡聚脱氧核苷酸链与真核表达载体pSUPER连接,构建重组pSUPER-HLA-G1真核表达载体,并用脂质体法将其转染入HTR-8/SVneo细胞系中。pSUPER-HLA-G1质粒转染后采用RT-PCR检测HLA-G1在HTR-8/SVneo细胞中的基因转录情况,Western blotting检测HLA-G1蛋白的表达情况。结果:构建的真核表达载体pSUPER-HLA-G1可在HTR-8/SVneo细胞中表达,HLA-G1 mRNA和其蛋白表达抑制率分别为74.85±7.43%和71.07±6.11%。结论:构建的人HLA-G1 siRNA蛋白真核表达载体pSUPER-HLA-G1有效地沉默了HLA-G1在HTR-8/SVneo滋养细胞中的基因表达及蛋白表达,为今后以HLA-G1为靶点的基因研究奠定了基础。

主 题 词：人类白细胞抗原G1(HLA-G1) RNA干扰(RNAi) 真核表达载体 子痫前期 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100211[100211] 10[医学] 

馆 藏 号：203118025...