尖孢镰刀菌TaqMan探针荧光定量PCR快速检测方法的建立及应用

作     者：汲珊珊 李君文 安娜 湛志强 陈照立 邱志刚 刘先宁 王新为 郭长江 金敏 JI Shan-shan;LI Jun-wen;AN Na;SHEN Zhi-qiang;CHEN Zhao-li;QIU Zhi-gang;LIU Xian-ning;WANG Xin-wei;GUO Chang-jiang;JIN Min

作者机构：广西医科大学公共卫生学院南宁530021 军事医学科学院卫生学环境医学研究所、天津市环境与食品安全风险监控技术重点实验室天津300050 西安市第一医院陕西省眼科研究所西安710002 

基　　金：'十二五'科技重大专项(2011ZX10004-001) 

出 版 物：《现代检验医学杂志》 (Journal of Modern Laboratory Medicine)

年 卷 期：2012年第27卷第6期

页      码：30-33页

摘      要：目的建立TaqMan探针荧光定量PCR检测方法，用于临床标本中尖孢镰刀菌的快速诊断。方法针对尖抱镰刀菌的B—tubulin基N。设计特异性引物和探针并构建该基N的重组质粒标准品；优化PCR反应条件，建立尖孢镰刀菌的荧光定量PCR检测方法；通过lO种标准菌株和33株，临床分离株的应用检测，验证该方法的可行性。结果该检测方法具有较好的特异度、敏感度和重复性，6袜尖孢镰刀茵均有明显扩增，而其它37株临床常见的致角膜炎真菌标准株或分离株无明显扩增；最低检出限为408copies／μl，且变异系数低于5％。结论研究成功建立了尖孢镰刀菌的TaqMan探针荧光定量PCR检测方法，对临床上真菌性角膜炎的快速诊断及指导用药具有实际应用性和重要意义。

主 题 词：TaqMan探针 荧光定量PCR 尖孢镰刀菌 真菌性角膜炎 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 071010[071010] 081704[081704] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-7414.2012.06.010

馆 藏 号：203118075...