PEDV、TGEV双重Taq Man实时荧光定量PCR方法的建立及病原学调查

作     者：陈秋勇 陈渊泉 陈如敬 车勇良 吴学敏 刘玉涛 周伦江 王隆柏 CHEN Qiuyong;CHEN Yuanquan;CHEN Rujing;CHE Yongliang;WU Xuemin;LIU Yutao;ZHOU Lunjiang;WANG Longbai

作者机构：福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建福州350013 福建省仙游县畜牧兽医局福建莆田351200 

基　　金：福建省科技计划公益类专项(2021R10260015) 福建省农业科技创新联盟专项(CXLM202206、CXLM2021004) 福建省科技重大专项(2021NZ029023) 

出 版 物：《福建农业学报》 (Fujian Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2022年第37卷第11期

页      码：1381-1387页

摘      要：【目的】实现猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的快速鉴别诊断,并调查分析福建省2019–2021年PEDV和TGEV流行情况。【方法】根据PEDV的N基因和TGEV的S基因序列分别设计特异性引物和标记FAM、VIC荧光报告基团的探针,建立、优化双重荧光定量PCR反应条件和体系,并检测其敏感性、特异性和重复性。应用该方法对福建省2019–2021年收集的297份疑似腹泻病料进行病原检测。【结果】建立的方法对PEDV和TGEV的最低检测限均为10拷贝·μL^(-1),比普通PCR检测灵敏度提高100倍;对其他常见猪病原不发生非特异性反应;批内、批间变异系数均小于1%。福建省297份临床样本检测结果显示,单PEDV感染率为88.89%,单TGEV感染率为1.01%,PEDV和TGEV混合感染率为3.37%。【结论】本研究建立的方法具有敏感性高、特异性强、稳定性好等特点。福建省内2019–2021年以PEDV感染为主,TGEV感染率低,存在PEDV、TGEV混合感染的情况。

主 题 词：猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 双重荧光定量PCR 流行情况 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.19303/j.issn.1008-0384.2022.011.002

馆 藏 号：203118202...