非洲猪瘟病毒p17蛋白的哺乳动物细胞表达及鉴定

作     者：乔思娜 赵款 刘佳晨 李国新 童武 周艳君 赵冉 童光志 高飞 李丽薇 QIAO Sina;ZHAO Kuan;LIU Jiachen;LI Guoxin;TONG Wu;ZHOU Yanjun;ZHAO Ran;TONG Guangzhi;GAO Fei;LI Liwei

作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 河北农业大学动物医学院河北保定071001 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 厦门市动物疫病预防控制中心福建厦门361009 

基　　金：上海市科技兴农项目(2022-02-08-00-12-F01162) 广东省重点领域研发计划(2019B020211003) 国家自然科学基金ASFV专项(31941017) 中国农科院统筹ASFV应急专项(Y2020YJ15) 河北省省属高等学校基本科研业务费(KY202017) 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2023年第55卷第3期

页      码：68-73页

摘      要：研究旨在利用哺乳动物细胞悬浮培养系统表达非洲猪瘟病毒(ASFV)p17蛋白,纯化并免疫小鼠,制备针对ASFV p17蛋白的特异性多克隆抗体。根据GenBank中公布的ASFV SY18毒株p17蛋白编码基因序列,设计特异性引物扩增p17基因片段,构建重组真核表达质粒pCDNA3.1-p17-strep。将其瞬时转染293i细胞,并利用下游strep标签进行蛋白纯化。纯化后的重组p17蛋白配合MnJ(β)胶体锰佐剂免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体血清。利用Western blot、间接免疫荧光试验鉴定该多克隆抗体的反应原性和特异性。结果显示:本试验成功构建pCDNA3.1-p17-strep真核表达质粒,转染293i细胞后纯化获得重组p17蛋白。免疫小鼠后制备的多克隆抗体与真核表达的p17蛋白及表达ASFV p17蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒均有良好的特异性免疫反应。本试验为深入探讨ASFV p17蛋白的生物学功能奠定了基础。

主 题 词：非洲猪瘟病毒 p17蛋白 293i细胞 多克隆抗体 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 

馆 藏 号：203118570...