猪鼻支原体荧光PCR检测方法的建立和应用

作     者：孙岩 闫丽辉 史林林 关野 刘恒贵 孙建宏 SUN Yan;YAN Li-hui;SHI Lin-lin;GUAN Ye;LIU Heng-gui;SUN Jian-hong

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物卫生检测中心黑龙江哈尔滨150069 

基　　金：国家自然科学基金项目(32002315 32172890) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2023年第53卷第2期

页      码：176-181页

摘      要：为了建立猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)快速荧光PCR检测方法,本研究合成了该病原特异性基因P37的重组质粒,根据该基因设计荧光PCR引物和探针,并对设计的引物和探针的特异性、敏感性和重复性进行了检测。结果显示,该方法具有高度的特异性,除了识别猪鼻支原体基因组外,对猪的基因组和猪常见病原的基因组均不发生交叉反应。在敏感性和重复性试验中,该方法对猪鼻支原体的检测限为1 000copies/m L,变异系数小于3%,因此具有优良的敏感性和稳定性。用该方法检测临床样本,阳性检出率为76%(38/50),远高于普通PCR的阳性检出率(40%,20/50)。上述结果表明,本研究建立的荧光PCR方法在特异性、敏感性和稳定性方面均满足猪鼻支原体的临床检测要求,可以用于猪鼻支原体临床样品的检测。

主 题 词：猪鼻支原体 荧光PCR 方法建立 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0026

馆 藏 号：203118586...