猫传染性腹膜炎病毒N蛋白原核表达及多克隆抗体制备

作     者：赵飞宇 杨丹 赵鹏宇 李梓健 李璐 孙东波 Zhao Feiyu;Yang Dan;Zhao Pengyu;Li Zijian;Li Lu;Sun Dongbo

作者机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 

基　　金：黑龙江八一农垦大学三横三纵科研团队支持计划(TDJH201804) 

出 版 物：《黑龙江八一农垦大学学报》 (journal of heilongjiang bayi agricultural university)

年 卷 期：2023年第35卷第1期

页      码：46-52页

摘      要：为制备猫传染性腹膜炎病毒N蛋白特异性多克隆抗体,研究根据HLJ/HRB/2016/11毒株N基因序列设计引物,通过PCR进行基因扩增,并将目的基因在Bam HⅠ、HindⅢ酶切位点克隆至pET32a(+)原核表达载体上,将其转化到BL21(DE3)感受态细胞,经终浓度为1 mmol·L^(-1)的IPTG在16℃诱导16 h后,SDS-PAGE检测表达产物,结果显示,在约69 kda处出现目的条带,且该蛋白主要以可溶形式表达。将重组N蛋白经Ni柱纯化后,按每只BALB/c小鼠免疫50μg,三免后7 d采血分离血清,经间接ELSA检测结果显示,获得的N蛋白可被特异性识别且效价可达到1∶12800。研究制备的猫传染性腹膜炎病毒N蛋白及其多克隆抗体为后续猫传染性腹膜炎的疫苗提供基础。

主 题 词：猫传染性腹膜炎病毒 衣壳蛋白 原核表达 多克隆抗体 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2090.2023.01.008

馆 藏 号：203118588...