miR-888和miR-891a的双重微滴式数字PCR检测在精液鉴定中的应用

作     者：魏孙祥 陈惠香 胡胜 赵一霞 石慧霞 王哲 李文 季安全 孙启凡 WEI Sun-xiang;CHEN Hui-xiang;HU Sheng;ZHAO Yi-xia;SHI Hui-xia;WANG Zhe;LI Wen;JI An-quan;SUN Qi-fan

作者机构：山西医科大学法医学院山西太原030001 公安部鉴定中心现场物证溯源技术国家工程实验室法医遗传学公安部重点实验室北京100038 

基　　金：公安部科技强警基础工作专项(2019GABJC13) 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2019JB010) 

出 版 物：《法医学杂志》 (Journal of Forensic Medicine)

年 卷 期：2022年第38卷第6期

页      码：719-725页

摘      要：目的 利用微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)技术建立可同时检测miR-888和miR-891a的体系,并评估其在精液鉴定中的应用价值。方法 通过设计不同荧光修饰的报告基团的水解探针实现对miR-888和miR-891a的双重ddPCR检测,对5种体液(外周血、月经血、精液、唾液、阴道分泌液)共75份样本进行检测,采用Mann-Whitney U检验进行差异性分析,通过ROC曲线分析评估miR-888和miR-891a区分精液的能力并获得鉴别的最佳截断值。结果 该体系双重检测与单独检测结果差异无统计学意义,检测灵敏度可达到0.1 ng总RNA,批内与批间变异系数均小于15%。经双重ddPCR检测,精液中miR-888和miR-891a的表达量均高于其他体液。经ROC曲线分析,miR-888的AUC为0.976,最佳截断值为2.250 copies/μL,判别正确率为97.33%;miR-891a的AUC为1.000,最佳截断值为1.100copies/μL,判别正确率为100%。结论 本研究成功建立了双重ddPCR检测miR-888和miR-891a的方法,体系的稳定性和重复性良好,可用于精液鉴定,miR-888和miR-891a均具有较高的精液鉴别能力,且miR-891a的判别正确率更高。

主 题 词：法医遗传学 微滴式数字聚合酶链反应 微小核糖核酸 精液 miR-888 miR-891a 

学科分类：0301[法学-法学类] 03[法学] 030106[030106] 

D　O　I：10.12116/j.issn.1004-5619.2021.510802

馆 藏 号：203118685...