抗血小板多肽在大肠杆菌中的克隆和表达

作     者：查艳萍 秦永文 荆清 穆瑞斌 

作者机构：第二军医大学长海医院心内科上海200433 

出 版 物：《药物生物技术》 (Pharmaceutical Biotechnology)

年 卷 期：2002年第9卷第1期

页      码：16-20页

摘      要：设计合成了两条编码KGDX (赖 甘 天冬 X)的寡核苷酸链 ,长度为 3 6个碱基对 ,两端分别为BamHI酶和XcoI酶切位点。将该基因插入原核高效表达载体PGEX 4T 1的tac启动子下游 ,获得重组质粒PGEX 4T 1KGDX ,转化大肠杆菌DH5a,3 7℃诱导使重组子表达。GST KGDX融合蛋白具有可溶性 ,产量为3 5mg/L培养基 ,表达量占菌体总蛋白 48 0 2 %。破碎菌体上清经谷胱甘肽 琼脂糖悬珠亲和层析法获得纯度为95 %的重组蛋白。1 2 5I7E3竞争拮抗实验结果表明 ,GST无GPIIb/IIIa结合作用 ,GST KGD融合蛋白能代替 7E3竞争性地与GPIIb/IIIa受体特异性结合 ,从而抑制血小板聚集。其IC5 0值为 40 μmol/L。

主 题 词：基因重组 纯化 大肠杆菌 GPIIb/IIIa拮抗剂 GST-KGDX融合蛋白 抗血小板作用 基因克隆 基因表达 急性冠脉综合征 治疗 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 100201[100201] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-8915.2002.01.003

馆 藏 号：203118855...