实验设计在重组人生长激素-Fc融合蛋白纯化工艺建立过程中的应用

作     者：毕江坤 俞露 张宇 张五妮 李利 刘涵 BI Jiangkun;YU Lu;ZHANG Yu;ZHANG Wuni;LI Li;LIU Han

作者机构：长春生物制品研究所有限责任公司细胞因子室吉林长春130012 

基　　金：吉林省软科学研究计划(20160204034YY) 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2023年第36卷第3期

页      码：336-340页

摘      要：目的 通过实验设计(Design of Experiment,DOE)对重组人生长激素-Fc(recombinant human growth hormone-Fc,rhGH-Fc)融合蛋白纯化工艺中阴离子交换层析的层析条件进行优化,以降低蛋白原液中宿主蛋白(host cell protein,HCP)含量。方法 利用Minitab 19中DOE功能创建4因子2水平完全析因实验设计,通过DOE对rhGH-Fc纯化工艺中离子交换层析条件(流速、上样量、缓冲液pH、洗脱液盐浓度)进行优化,找出操作空间。结果 建立的DOE模型能准确预测实验结果,其中上样量、缓冲液pH、洗脱盐浓度以及缓冲液pH与洗脱液盐浓度的交互效应对收获液中HCP含量有显著影响。获得的最佳层析条件为:上样量15 mg/mL,流速120 cm/h,洗脱液pH 7.0~8.0,洗脱液盐浓度0.1 mol/L。该层析条件下洗脱液中HCP含量均<400 ng/mg,在确定操作空间的结果范围内满足验证要求。结论 本实验成功应用DOE确定了阴离子交换层析去除HCP的最佳层析条件,为其在生物制药领域的更多应用提供了参考。

主 题 词：实验设计 重组人生长激素-Fc 宿主蛋白 纯化 

学科分类：1007[医学-药学类] 10[医学] 

D　O　I：10.13200/j.cnki.cjb.003841

馆 藏 号：203118856...