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海马齿小热激蛋白SpHSP18.1基因的克隆及盐胁迫表达分析

海马齿小热激蛋白SpHSP18.1基因的克隆及盐胁迫表达分析

作     者:许天委 张晓楠 刘煜 叶绵源 张世杰 刘然 刘盛琨 张颖 

作者机构:琼台师范高等专科学校数理系海口571127 海南师范大学生命科学学院海口571158 

基  金:国家自然科学基金项目(31360173) 海南省自然科学基金项目(312091) 海南师范大学2015年度"大学生创新创业训练计划"项目资助~~ 

出 版 物:《应用与环境生物学报》 (Chinese Journal of Applied and Environmental Biology)

年 卷 期:2015年第21卷第5期

页      码:882-886页

摘      要:为探究海马齿高盐环境耐受性的分子机制,根据海马齿c DNA文库序列设计引物,采用RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术克隆得到海马齿小分子热激蛋白Sp Hsp18.1基因序列.Blast分析表明,该c DNA序列(968 bp)含完整开放阅读框(ORF)全长为489 bp,编码162个氨基酸.等电点(p I)为6.19,分子量(Mr)大小为1860 *** HSP18.1编码氨基酸序列具有分子伴侣蛋白特有的ACD保守区域(Alpha crystallin domain),与拟南芥、西瓜等植物的细胞质I型小热激蛋白具较高同源性(>75%).将Sp Hsp18.1基因克隆到PUCm-T原核表达载体上,得到重组菌株,通过过量表达探究其耐热胁迫能力.结果表明,在37℃下重组菌株与野生型菌株的生长曲线基本相似,但在高温(45℃)下,重组菌株较对照组菌株存活率有显著提高.荧光实时定量PCR分析表明,在不同浓度海水培养条件下,海马齿根部均表达Sp Hsp18.1基因,且随着海水浓度的增加,该基因的表达量呈现上升的趋势.说明Sp Hsp18.1基因在海马齿应答高盐胁迫过程中起到一定的作用.

主 题 词:海马齿 小分子热激蛋白 分子克隆 盐胁迫 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 0830[工学-生物工程类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.3724/sp.j.1145.2015.04062

馆 藏 号:203118860...

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