猪圆环病毒2型原位杂交检测技术的建立与应用

作     者：姚鑫 杨汉春 郭鑫 陈艳红 查振林 YAO Xin;YANG Han-chun;GUO Xin;CHEN Yan-hong;ZHA Zhen-lin

作者机构：中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点开放实验室北京100094 

基　　金：教育部跨世纪优秀人才资助计划(2003) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2007年第38卷第2期

页      码：169-174页

摘      要：参照GenBank发表的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列设计引物,利用PCR扩增得到PCV2 BF株341 bp的核酸片段,用随机引物法制备出地高辛标记的核酸探针。制备的探针与PCV1、PRRSV、PPV、PRV等不发生反应,可检测的最低PCV2 DNA含量为1.78 pg。对30份临床组织样本进行了检测,并与PCR比较,结果表明,阴性符合率为100%,阳性符合率为88.9%。应用原位杂交技术分析了PCV2在人工感染仔猪主要组织中的分布,结果表明,感染后3 d,从仔猪的淋巴结、胸腺、肺脏、脾脏、鼻黏膜可检测到阳性信号,感染后21 d,肝脏、肾脏、胰腺和回肠可检出阳性信号,至感染后42 d,可从心脏、胃、脑检出阳性信号。在整个试验过程中会厌软骨、膀胱、皮肤、肌肉等组织均为阴性。本研究结果表明,建立的PCV2原位杂交技术具有良好的敏感性和特异性,可用于PCV2的实验室诊断和感染靶细胞的定位分析。

主 题 词：猪圆环病毒2型 核酸探针 原位杂交 分布 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0366-6964.2007.02.012

馆 藏 号：203119358...