高转移小鼠肺癌株细胞导入人基因组DNA后的转移表型抑制

作     者：陆应麟 葛学铭 付生法 王升启 陈坤 刘爽 

作者机构：北京基础医学研究所 北京放射医学研究所 

出 版 物：《中华医学杂志》 (National Medical Journal of China)

年 卷 期：1997年第77卷第11期

页      码：829-833页

摘      要：目的探讨从正常人细胞基因组ＤＮＡ中寻找、分离并鉴定肿瘤转移抑制基因或相应ＤＮＡ序列的新途径。方法采用体内转移灶体外再培养及硬琼脂集落克隆化筛选，获体内９０％以上高转移率小鼠肺腺癌ＬＭ２细胞株；使用磷酸钙共沉淀ＤＮＡ转染技术，将正常细胞人基因组ＤＮＡ随机片段，导入高转移小鼠肺癌细胞株ＬＭ２后，使用有限稀释法克隆化其中形态扁平的回复突变株。为证实细胞确实含有外源人ＤＮＡ序列，设计人特异性Ａｌｕ引物，对回复突变细胞ＤＮＡ进行ＩｎｔｅｒＡｌｕ－ＰＣＲ扩增。并以ｎｍ２３为探针进行ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交。对其中含人ＤＮＡ小鼠细胞，进行生长速率及硬琼脂集落生成率检测；最后细胞接种在裸小鼠及同系Ｔ７３９小鼠项背部皮下以检验其自发转移率。结果转染细胞经筛选获８株扁平状的回复突变株，经ＩｎｔｅｒＡｌｕ－ＰＣＲ扩增发现其中的６株含特异性人ＤＮＡ，ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交除对照ｋ５６２细胞ｎｍ２３阳性外皆为阴性。１２、２０、３２号生长速率及硬琼脂集落生成率明显低于母细胞ＬＭ２株。１２、２０号与ＬＭ２母细胞接种裸鼠后，全部长瘤，其中接种１２号株６只裸小鼠，１只瘤体在４０天后自发吸收消退且４只肺上无转移，而接种ＬＭ２母细胞的裸鼠全部有肺转移?

主 题 词：肿瘤转移 抑制基因 聚合酶链反应 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

馆 藏 号：203119403...