设计特异性结合HBVX基因启动子的人工锌指蛋白以抑制HepG2.2.15细胞中HBV的转录

作     者：祝艺耘 付愚 李中堂 刘锐 魏续福 吴忠均 Zhu Yiyun;Fu Yu;Li Zhongtang;Liu Rui;Wei Xufu;Wu Zhongjun

作者机构：重庆医科大学附属第一医院肝胆外科重庆400016 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:81171562) 

出 版 物：《重庆医科大学学报》 (Journal of Chongqing Medical University)

年 卷 期：2014年第39卷第7期

页      码：929-932页

摘      要：目的：设计人工锌指蛋白（zinc finger protein，ZFP）特异性结合于乙型肝炎病毒x蛋白（hepatitis B virus X protein，HBX）基因启动子，观察zFP在体外对乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）转录的抑制。方法：将pcDNA3．1-ZFP转染入HepG2．2．15细胞24h后，用Western blot检测HBX蛋白的含量：用ELISA和real—time PCR检测上清液中乙型肝炎核心相关抗原（hepatitis B eantigen，HBeAg）和HBV DNA含量，用RT—PCR检测胞内HBV mRNA水平。结果：ZFP可抑制HepG2．2．15细胞中HBX的表达；相比空质粒组，ZFP组细胞培养上清液中HBV DNA拷贝量和HBeAg含量分别下降了51．7％（t=23．079，P=0．000，95％CI=44．98％-58．52％）、33．8％（t=3．887，P=-0．003，95％CI=12．12％～55．48％）；细胞内HBVmRNA也明显减少（t=3．616，P=0．022）。结论：人工设计的可特异性结合于HBX的ZFP可于HepG2．2．15细胞中有效抑制HBV转录。

主 题 词：乙型肝炎病毒 X基因启动子 锌指蛋白 HepG2 2 15细胞 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13406/j.cnki.cyxb.000178

馆 藏 号：203119693...