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雌激素受体α-shRNA慢病毒载体对根尖牙乳头干细胞成牙/成骨向分化的影响

雌激素受体α-shRNA慢病毒载体对根尖牙乳头干细胞成牙/成骨向分化的影响

作     者:马姝 闫明 吴锦涛 王子露 张光东 于金华 MA Shu;YAN Ming;WU Jintao;WANG Zilu;ZHANG Guangdong;YU Jinhua

作者机构:南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室江苏南京210029 南京医科大学附属口腔医院牙体牙髓科江苏南京210029 

基  金:国家自然科学基金(81371144) 江苏省自然科学基金(BK20131392) 江苏高校优势学科工程(2014-37) 

出 版 物:《口腔医学》 (Stomatology)

年 卷 期:2015年第35卷第5期

页      码:341-344页

摘      要:目的构建雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒表达载体,探讨其对根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAPs)体外成牙/成骨向分化的影响。方法根据shRNA设计原则,合成用于体内干扰ERα的两条shRNA序列,重组入慢病毒载体PLKO.1。将PLKO.1对照组与ERα-shRNA(sh ERα-1和sh ERα-2)实验组分别感染SCAPs,western blot检测ERα的表达及其对SCAPs成牙/成骨向分化的影响。结果测序结果证实重组质粒构建成功;体外实验表明,SCAPs转染ERα-shRNA后ERα蛋白表达水平降低,其中sh ERα-2组对ERα的下调作用更明显,两组ERα-shRNA中核心结合蛋白因子2(runt-related transcription factor-2,RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)、牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达均有不同程度下调,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论慢病毒介导的ERα-shRNA成功在体外抑制了目的基因的表达,并显著影响了根尖牙乳头干细胞的成牙/成骨向分化。

主 题 词:短发夹RNA 慢病毒载体 雌激素受体α 根尖牙乳头干细胞 

学科分类:1003[医学-口腔医学类] 100301[100301] 10[医学] 

D O I:10.13591/j.cnki.kqyx.2015.05.006

馆 藏 号:203119724...

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