田鼠巴贝虫感染FTA-环介导等温扩增检测技术的建立

作     者：吴芬 蔡玉春 秦志强 艾琳 卢艳 陈绍红 吴秀萍 陈家旭 

作者机构：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 

基　　金：公益性卫生行业科研专项经费资助项目(No.201202019) 上海市卫生计生委青年基金项目(No.20154Y0155)联合资助~~ 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2016年第32卷第5期

页      码：435-441页

摘      要：目的建立敏感、特异、高效的检测田鼠巴贝虫FTA-环介导等温扩增技术(LAMP)。方法根据GenBank公布的田鼠巴贝虫基因序列,就细胞色素B基因保守序列设计了多套LAMP引物,利用LAMP RealTime Turbidimeter LA-320仪筛选最佳引物、反应条件,建立LAMP检测方法,从保存有血液样本的FTA卡片中提取田鼠巴贝虫DNA进行LAMP,观察检测效果。结果设计的4组引物做LAMP试验,其中以引物1,最佳反应温度为64℃,恒温下作用,敏感性高,可在1h内完成,其检出限量为0.687fg/μL,而PCR的最低检测量为0.687pg/μL,与间日疟原虫、恶性疟原虫、卵形疟原虫、三日疟原虫、诺氏疟原虫、冈地弓形虫、利什曼原虫、冈比亚锥虫均无交叉反应。以建立的FTA-LAMP法检测20份PCR检测阳性的田鼠巴贝虫感染者血样,其阳性符合率100%。结论成功建立了检测田鼠巴贝虫特异性细胞色素B基因的FTA-LAMP方法,该法特异性强、灵敏度高、简便、快速、适于现场应用。

主 题 词：田鼠巴贝虫 环介导等温扩增技术 FTA卡 细胞色素B基因 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2016.05.004

馆 藏 号：203119762...