栽培草莓果实中特异表达的bHLH78基因的克隆及过量表达载体构建

作     者：豆玉娟 曹飞 马跃 李贺 刘月学 张志宏 Dou Yujuan;Cao Fei;Ma Yue;Li He;Liu Yuexue;Zhang Zhihong

作者机构：沈阳农业大学园艺学院沈阳110866 

基　　金：国家科技支撑计划课题(2013BAD02B04)资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2014年第12卷第3期

页      码：456-465页

摘      要：根据二倍体野生森林草莓(Fragaria vesca)预测的bHLH78-like基因序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术从八倍体栽培凤梨草莓(Fragaria×ananassa)品种‘幸香’果实中克隆出FabHLH78基因全长CDS。测序和分析结果表明,FabHLH78基因的CDS全长1 653 bp,编码550个氨基酸残基,在线软件Compute pI/Mw分析编码的蛋白质理论分子量约为59.6 kD、等电点(pI)6.17,经软件DNAMAN分析,核酸序列和氨基酸序列与二倍体草莓FvbHLH78-like基因的一致性分别为98.31%和96.55%。利用半定量PCR检测FabHLH78基因在草莓根、匍匐茎、叶、果实中的表达情况,发现其只在果实中特异表达;实时定量RT-PCR结果显示随着果实发育FabHLH78基因表达量逐渐增加。FabHLH78全长CDS被整合到植物表达载体pRI101-AN上,构建出FabHLH78基因的过量表达载体pRI101-bHLH78,为进一步验证FabHLH78基因的功能奠定了基础。

主 题 词：bHLH78 草莓 基因克隆 实时定量PCR 过量表达载体 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090201[090201] 

D　O　I：10.13271/j.mpb.012.000456

馆 藏 号：203119857...