快速诊断小鹅瘟PCR方法的优化建立

作     者：赵磊 王旋 龚争 吴章青 张训海 ZHAO Lei;WANG Xuan;GONG Zheng;WU Zhang-qing;ZHANG Xun-hai

作者机构：安徽科技学院家禽疫病防控监测安徽省重点实验室安徽凤阳233100 

基　　金：安徽省农业产业技术体系家禽产业 安徽科技学院自然科学一般项目(ZRC2013381) 

出 版 物：《安徽科技学院学报》 (Journal of Anhui Science and Technology University)

年 卷 期：2014年第28卷第6期

页      码：5-9页

摘      要：为建立快速诊断小鹅瘟的PCR方法,根据已发表的GPV主要结构蛋白VP3基因序列,经多序列比对和Oligo 6.0软件分析设计特异性PCR引物。以微量法提取病鹅肝组织DNA,优化PCR反应引物退火温度、循环次数和鉴定其特异性,并与酚氯仿法和煮沸法进行同步对比研究。结果显示,建立的PCR检测方法能够特异性检测病鹅肝组织中GPV的核酸,其扩增片段大小为343bp,最佳退火温度为58℃,最佳循环次数为35次。微量法提取的病毒核酸PCR检测灵敏度分别是酚氯仿法的50倍和煮沸法的2500倍。该PCR检测方法不与鹅副黏病毒、禽流感病毒、传染性支气管炎病毒、鸭瘟病毒以及健康鹅肝组织发生交叉反应。本研究建立的GPV PCR检测方法能够快速诊断小鹅瘟。

主 题 词：小鹅瘟 PCR 快速诊断 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-8772.2014.06.002

馆 藏 号：203120131...