纳米金PCR技术检测副溶血弧菌方法的建立与初步应用

作     者：刘阳 孔繁德 彭小莉 徐淑菲 吴德峰 林方 

作者机构：厦门出入境检验检疫局福建厦门361026 福建农林大学动物科学学院福州350002 

基　　金：国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2010IK016)资助 

出 版 物：《福建畜牧兽医》 (Fujian Journal of Animal Husbandry and Veterinary medicine)

年 卷 期：2012年第34卷第1期

页      码：9-12页

摘      要：纳米金PCR是在普通PCR基础上发展起来的新技术,它能够明显提高普通PCR的灵敏度和特异性。根据副溶血弧菌(VP)的toxR基因序列,应用primer6.0设计一对特异性引物,建立了纳米金PCR方法,并对该方法的最佳反应条件、循环数、特异性和灵敏度进行测定。采用2.0%琼脂糖电泳进行检测,结果表明能扩增得到与试验设计相符的208bp(VP)的特异性条带;与溶藻弧菌、霍乱弧菌、麦氏弧菌、沙门氏菌、枸橼酸杆菌没有交叉反应;纯培养细菌检测灵敏度为3cfu/反应体系。与普通PCR法进行比较,该方法检测灵敏度比普通PCR高10倍。经临床检测,从150份带鱼、鱿鱼和鱼粉中检出5份阳性样品,与常规细菌分离鉴定方法符合率100%。该试验方法的建立对于加强进出口水产品中VP的检验检疫具有十分重要的意义。

主 题 词：副溶血弧菌 纳米PCR 

学科分类：0906[农学-水产类] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1003-4331.2012.01.005

馆 藏 号：203120169...