正交设计优化电转染CHO细胞的方法

作     者：陆俭 李萍 马亚茹 陈勇 蒋琳 LU Jian;LI Ping;MA Ya-Ru;CHEN Yong;JIANG Lin

作者机构：兰州生物制品研究所甘肃兰州730046 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2011年第22卷第5期

页      码：713-716页

摘      要：目的:探讨细胞电穿孔转染的优化方法。方法:按照L9(34)正交表安排各因素水平的细胞电敏感性实验,以台盼蓝染色计数确定细胞存活率,最接近50%存活率为最优方案,根据最优方案将CHO-dhfr-细胞与DNA混匀电穿孔转染以验证正交设计结果。结果:CHO-dhfr-细胞电转染的优化参数为低离子强度Tris-Cl缓冲液、750 V/cm、50μF、电击2次、间隔1 min,各因素对转染的影响大小依次为缓冲液、电场强度、脉冲次数、电容。结论:确定了电穿孔法转染CHO-dhfr-细胞的方法,为进一步应用该细胞株表达重组蛋白打下了基础。

主 题 词：电穿孔法 CHO-dhfr-细胞 正交设计 

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-0002.2011.05.026

馆 藏 号：203120321...