腺病毒-阴离子脂质体复合物的制备和体外表征

作     者：钟志容 万瑜 石三军 张志荣 孙逊 

作者机构：四川大学华西药学院四川成都610041 泸州医学院四川泸州646000 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81173011) 

出 版 物：《药学学报》 (Acta Pharmaceutica Sinica)

年 卷 期：2012年第47卷第1期

页      码：116-123页

摘      要：为了制备腺病毒-阴离子脂质体复合物(AL-Ad5),首先利用HEK 293细胞大量扩增了带有绿色荧光蛋白报告基因的重组腺病毒,并以氯化铯两步密度梯度离心法进行纯化,再通过细胞病变效应(CPE)法、壳蛋白免疫法和定量聚合酶链反应(Q-PCR)法分别测定腺病毒滴度。以中心组合设计法优化处方和制备条件,通过钙离子融合法制备目标复合物AL-Ad5,以透射电镜和动态光散射法分别对其外观形态、粒径和zeta电位进行考察;并制备双色荧光标记的复合物,通过激光共聚焦技术观察该复合物被MDCK细胞摄取后的胞内定位,以考察阴离子脂质体对腺病毒的包合情况。结果表明,目标复合物分布均匀,粒径和zeta电位分别为(211±10)nm和(-41.2±2.2)mV。激光共聚焦实验结果表明,红色荧光标记的腺病毒和绿色荧光标记的脂质体在MDCK细胞内的定位一致。由此说明,阴离子脂质体能够较好地包裹腺病毒以形成腺病毒-阴离子脂质体复合物。

主 题 词：腺病毒 阴离子脂质体 中心组合设计 钙离子融合法 激光共聚焦 壳蛋白免疫染色 定量聚合酶链反应 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 100702[100702] 1007[医学-药学类] 1006[医学-中西医结合类] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16438/j.0513-4870.2012.01.021

馆 藏 号：203120392...