病原性鳗弧菌(Vibrio anguillarum)双重PCR与LAMP检测方法的建立

作     者：孙晶晶 高晓建 张晓君 马丽娜 阎斌伦 白雪松 赵佳铭 毕可然 秦蕾 

作者机构：淮海工学院连云港222005 扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 吉林大学再生医学研究所长春130021 

基　　金：江苏省高校自然科学研究重大项目(14KJA240001) 江苏省水产三项工程项目(Y2014-35 D2013-5-4) 江苏高校优势学科建设工程项目(2014) 教育部留学回国人员科研启动基金共同资助 

出 版 物：《渔业科学进展》 (Progress in Fishery Sciences)

年 卷 期：2015年第36卷第6期

页      码：49-55页

摘      要：本研究检测了分离自发病大菱鲆、半滑舌鳎及鲤鱼的22株病原鳗弧菌（Vibrio anguillarum）毒力相关基因的携带情况,并建立了病原鳗弧菌的分子生物学检测方法。以PCR方法检测8个毒力相关基因的分布,结果显示,22株病原鳗弧菌均可扩增出6个基因（empA、vah1、vah4、flaA、rtxA和tonB）目的条带,未扩增出virA和angM基因;针对vah4和rtxA设计引物进行双重PCR扩增,同一PCR反应体系可扩增出两条目的条带,灵敏度为2.4×103 CFU/ml,对照菌无任何扩增条带;以vah4设计引物进行LAMP扩增,病原鳗弧菌可扩增出阶梯状条带,呈现阳性反应,6株对照菌无阶梯状扩增条带且呈现阴性反应,LAMP扩增灵敏度为2.4×10~1 CFU/ml。LAMP检测灵敏度是双重PCR的100倍,LAMP技术与PCR比较,操作简便、快速、灵敏度高且不需昂贵仪器,LAMP检测鳗弧菌的方法更适合于养殖生产实际应用。

主 题 词：鳗弧菌 毒力相关基因 双重PCR 环介导恒温扩增技术(LAMP) 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 

核心收录：

D　O　I：10.11758/yykxjz.20150608

馆 藏 号：203120637...