PCI-hTGF-β1转染体外培养成人退变椎间盘细胞及其表达产物的测定(英文)

作     者：张雷 孙绍伟 陈聪 陈康 胡有谷 郑洪军 Zhang Lei;Sun Shao-wei;Chen Cong;Chen Kang;Hu You-gu;Zheng Hong-jun

作者机构：威海市立医院骨科山东省威海市264200 山东省创伤骨科研究所山东省青岛市266003 

基　　金：山东省九五攻关课题(26)~~ 

出 版 物：《中国临床康复》 (Chinese Journal of Clinical Rehabilitation)

年 卷 期：2006年第10卷第5期

页      码：141-143,i0006页

摘      要：背景:人转化生长因子β1基因可用于椎间盘退变的基因治疗,但有效载体的构建是实验的关键。目的:测定真核表达载体PCI-hTGF-β1转染体外培养成人退变椎间盘细胞可否表达产物人转化生长因子β1,为椎间盘退变的基因治疗提供实验基础。设计:单一样本实验。单位:山东省创伤骨科研究所,一所市立医院骨科。材料:实验于1999-10/2001-01在山东省创伤骨科研究所实验室进行。椎间盘标本均为椎间盘突出症患者手术中取材(获患者知情同意)。标本1为30岁女性的L45/椎间盘,标本2为38岁女性的L5/S1椎间盘。方法:①培养成人退变椎间盘细胞:标本离体30min内取回实验室,收集原代培养的纤维环细胞和髓核细胞。②转染:将细胞置于24孔培养板中,每孔细胞数目在5.5×105个,应用构建的PCI-hTGF-β1真核表达载体对其进行转染,并设立转染PCI组和未转染组。③用免疫组织化学方法对转染48h后的细胞进行表达产物测定。主要观察指标:两个标本中,各组原代纤维环细胞和髓核细胞中真核表达载体PCI-hTGF-β1的阳性细胞产物的吸光度值比较。结果:①标本1:原代纤维环细胞和原代髓核细胞中真核表达载体PCI-hTGF-β1的阳性细胞产物的吸光度值为PCI组的3.49,3.69倍,为未转染组的3.55倍。②标本2:原代纤维环细胞和原代髓核细胞中真核表达载体PCI-hTGF-β1的阳性细胞产物的吸光度值为PCI组的3.56,3.46倍,为未转染组的3.43,3.33倍。结论:PCI-hTGF-β1是人转化生长因子β1基因在体外培养退变椎间盘细胞转染中有效的真核表达载体,可以成功转染体外培养的成人退变椎间盘细胞,并可获得人转化生长因子β1基因产物的高表达。

主 题 词：椎间盘 细胞培养 转化生长因子β/遗传学 转染 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

D　O　I：10.3321/j.issn:1673-8225.2006.05.024

馆 藏 号：203120863...