PCR检测对虾白斑综合征病毒(WSSV)中假阴性的探讨

作     者：闫冬春 董双林 黄倢 YAN Dong-Chun;DONG Shuang-Lin;HUANG Jie

作者机构：中国海洋大学水产学院教育部水产养殖重点实验室 鲁东大学生命科学学院烟台264025 中国水产科学研究院黄海水产研究所 

基　　金：国家自然科学基金资助项目 30371111号 国家973项目资助 G1999012011号 中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室开放课题(2004) 烟台师范学院博士基金资助 043301号 

出 版 物：《海洋与湖沼》 (Oceanologia Et Limnologia Sinica)

年 卷 期：2007年第38卷第2期

页      码：146-150页

摘      要：采用PCR、核酸探针斑点杂交、组织切片等方法研究了PCR检测白斑综合征病毒(WSSV)中的假阴性问题。设计了一对引物用于PCR检测WSSV,PCR扩增的产物长度为235bp,检出极限为0.1pg WSSV DNA。结果表明,PCR检测15例攻毒螯虾鳃样品时出现一例阴性,而经10—106倍稀释后的样品却呈现阳性,推断PCR出现了假阴性。核酸探针斑点杂交及组织切片结果表明注射WSSV的螯虾鳃组织确已被严重感染,进一步证实了PCR假阴性。根据PCR的检出极限及模板稀释梯度,推算出该PCR能成功扩增的引物与模板浓度的比例范围约为2.4×105—2.4×1010。

主 题 词：PCR 假阴性 白斑综合征病毒 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0029-814X.2007.02.009

馆 藏 号：203120896...