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天蚕素B-黄体生成素释放激素结合部位重组基因的构建及其抑癌功能的研究

天蚕素B-黄体生成素释放激素结合部位重组基因的构建及其抑癌功能的研究

作     者:李小永 李荷莲 郑桂英 LI Xiao-yong;LI He-lian;ZHENG Gui-ying

作者机构:浙江大学医学院附属妇产科医院妇科杭州310006 吉林大学第二临床医院妇产科 

出 版 物:《中华妇产科杂志》 (Chinese Journal of Obstetrics and Gynecology)

年 卷 期:2007年第42卷第7期

页      码:477-481页

摘      要:目的构建天蚕素 B-黄体生成素释放激素结合部位(CB-LHRH )重组基因,探讨 CB-LHRH 蛋白成为新型抗肿瘤靶向药物的可能性。方法设计并人工合成 CB-LHRH′重组基因序列,应用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达目的蛋白并通过蛋白斑点印迹法鉴定,采用二甲氧唑黄(XTT)比色法检测不同剂量的目的蛋白对卵巢上皮性癌细胞株 SKOV3(LHRH 受体阴性)和子宫内膜癌细胞株 HEC-1B(LHRH 受体阳性)细胞的生长抑制率,并进行镜下形态观察。结果蛋白斑点印迹法检测结果显示,重组杆状病毒感染的 Sf9细胞裂解液呈现棕色,证实 CB-LHRH 蛋白已表达。重组杆状病毒感染的昆虫细胞系 Sf9细胞裂解液对 SKOV3及 HEC-1B 细胞的生长抑制率,随作用时间的延长和剂量的增加而增加,SKOV3细胞的生长抑制率从(5.03±0.08)%增加至(53.24±1.22)%,HEC-1B细胞的生长抑制率从(5.13±0.37)%增加至(56.16±1.08)%。相同剂量的重组杆状病毒感染的 Sf9细胞裂解液,作用相同时间,其对 HEC-1B 细胞的生长抑制率高于 SKOV3细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。经重组杆状病毒感染的 St9细胞裂解液作用后,镜下可见癌细胞出现明显改变甚至成片坏死崩解为无定形的颗粒状物质。结论 CB-LHRH 蛋白可有效杀伤 LHRH 受体阳性的HEC-1B 细胞,有望成为治疗表达 LHRH 受体的肿瘤的抗肿瘤靶向药物。

主 题 词:抗生素类  促性腺素释放激素 重组 遗传 受体 LHRH 杆状病毒科 细胞系 肿瘤 

学科分类:1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 1002[医学-临床医学类] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3760/j.issn:0529-567x.2007.07.012

馆 藏 号:203120904...

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