肉制品中猪肉源成分的Proofman-梯型熔解温度等温扩增检测

作     者：王博锐 许丹丹 谷蒙林 姚蔚 王耀 肖付刚 王德国 WANG Borui;XU Dandan;GU Menglin;YAO Wei;WANG Yao;XIAO Fugang;WANG Deguo

作者机构：河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471000 许昌学院食品与药学院河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室河南许昌461000 河南工业大学粮油食品学院河南郑州450001 

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金项目(31701689) 国家自然科学基金面上项目(32172300) 河南省科技攻关项目(212102110214) 河南省高校重点研发项目(21B550006) 

出 版 物：《肉类研究》 (Meat Research)

年 卷 期：2023年第37卷第3期

页      码：28-32页

摘      要：建立一种基于Proofman探针(proofreading enzyme-mediated probe cleavage)的梯型熔解温度等温扩增(ladder-shape melting temperature isothermal amplification,LMTIA)方法检测肉制品中的猪肉成分。选取猪细胞核中的特异性基因PRLR为靶基因,设计LMTIA引物和Proofman探针。通过优化反应体系,对所建立的方法进行特异性、灵敏度和最低检测限结果评价。结果表明:所建立的Proofman-LMTIA方法可在30 min内完成检测;相对于从鸡肉、鸭肉、牛肉、羊肉、猫肉、狗肉、玉米淀粉、红薯淀粉、木薯淀粉、绿豆淀粉、小麦粉中提取的基因组DNA,可特异性检测猪基因组DNA;检测灵敏度为1 ng/μL,对人工模拟的混合肉样中猪肉的最低检测限为0.1%。所建立的Proofman-LMTIA方法对猪肉成分有较好的特异性,能够快速、准确检测出肉制品中的猪肉成分,可对猪肉掺假进行快速检测。

主 题 词：Proofman探针 梯型熔解温度等温扩增技术 猪肉 快速检测 

学科分类：0832[0832] 08[工学] 083203[083203] 

D　O　I：10.7506/rlyj1001-8123-20221215-156

馆 藏 号：203120980...