中国南海堂皇芋螺毒素基因克隆及两个毒素的合成及活性研究

作     者：黄悦 宁胡莹 吴传侠 孙婷 张龙霄 余硕 刘珠果 戴秋云 廖明 HUANG Yue;NING Hu-ying;WU Chuan-xia;SUN Ting;ZHANG Long-xiao;YU Shuo;LIU Zhu-guo;DAI Qiu-yun;LIAO Ming

作者机构：广西医科大学药学院广西南宁530021 军事科学院军事医学研究院生物工程研究所北京100071 广西医科大学蛇毒研究所/广西医科大学生命科学院广西南宁530021 

基　　金：国家重点研发计划(项目名称:深海生物毒素致伤防护关键技术、方案和产品研究 项目编号:2019YFC0312605) 

出 版 物：《蛇志》 (Journal of Snake)

年 卷 期：2023年第35卷第1期

页      码：17-22页

摘      要：目的 研究中国南海堂皇芋螺(Conus imperialis)毒素基因序列,为毒素功能研究奠定基础。方法 采用Trizol法提取堂皇芋螺毒腺管的总RNA,应用3’端快速扩增cDNA末端(3’RACE)及巢式PCR技术,获得A、O、J超家族芋螺毒素新序列;或以A家族高度保守的内含子及3’端非翻译区(3’UTR)设计引物,克隆出新的α-芋螺毒素新序列。选择合成毒素ImIIA及Im1.2,测定ImIIA二硫键的连接方式,并测定两种毒素对神经型烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)的抑制活性。结果 获得11条毒素前体肽序列,分属A、O1、O2、J3等超家族,其中Im1.95为已报道芋螺毒素,其余为新发现芋螺毒素。ImIIA二硫键连接方式为少见的“C1-C2,C3-C4”,10μmol/L Im1.2、ImIIA对α2β2、α2β4、α4β2、α3β2、α3β4 5个nAChR亚型抑制活性较低。结论 通过基因克隆方法,从堂皇芋螺中获得了11个芋螺毒素,其中10个为新序列,属于A、O1、O2、J3等超家族毒素,Im1.2、ImIIA对神经型nAChR各受体亚型活性较低。

主 题 词：堂皇芋螺 克隆 合成 二硫键 烟碱型乙酰胆碱受体 

学科分类：1007[医学-药学类] 100703[100703] 1006[医学-中西医结合类] 100706[100706] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-5639.2023.01.005

馆 藏 号：203121085...