甲型H1N1(2009)流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价

作     者：秦智锋 张彩虹 孙洁 刘建利 卢体康 阮周曦 林庆燕 吕建强 曹琛福 曾少灵 陈书琨 廖立珊 花群义 QIN Zhi-feng;ZHANG Cai-hong;SUN Jie;LIU Jian-li;LU Ti-kang;RUAN Zhou-xi;LIN Qing-yan;LV Jian-qiang;CAO Chen-fu;ZENG Shao-ling;CHEN Shu-kun;LIAO Li-shan;HUA Qun-yi

作者机构：深圳出入境检验检疫局广东深圳518001 深圳市检验检疫科学研究院广东深圳518001 深圳市外来有害生物质检测技术研发重点实验室广东深圳518045 

基　　金：深圳市地方性标准制订项目(2010年安全类46) 深圳出入境检验检疫局青年科技计划(SZ2011201) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2013年第35卷第1期

页      码：48-53页

摘      要：自甲型H1N1(2009)流感病毒于2009年在世界多个国家暴发流行后,许多国家的猪群中检测到该病毒的存在,因此建立快速准确的甲型H1N1流感病毒的检测方法成为迫切需求。本研究针对甲型H1N1(2009)流感病毒NA基因设计特异性引物和探针,建立甲型H1N1(2009)流感病毒特异性实时荧光RT-PCR快速检测方法。并将该方法与WHO推荐美国CDC建立的检测方法和美国农业部推荐的检测方法进行比较。通过田间试验验证该方法在实际应用中的效果。结果表明:本研究建立的方法对检测甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的灵敏度达到10-6,与WHO推荐的A型流感病毒实时荧光PCR检测方法的灵敏度一致,并且高于美国农业部推荐方法的检测灵敏度(10-5);该方法特异性强,与经典型H1N1和其他亚型流感病毒株无任何交叉反应。与香港兽医化验所进行了检测比对,检测灵敏度和特异性完全一致。近3 800份的田间试验表明,所建立的方法准确可靠。本研究所建立检测方法快速灵敏,检测结果准确可靠,适合用于甲型H1N1(2009)流感病毒的分子生物学检测和监测。

主 题 词：甲型H1N1(2009)流感病毒 实时荧光RT-PCR 快速检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2013.01.12

馆 藏 号：203121142...