中华按蚊和雷氏按蚊实时荧光定量PCR鉴定方法的建立与应用

作     者：舒黄芳 王可艺 吴德 林荣幸 卢文成 阮彩文 邓卓晖 张萌 宋铁 SHU Huang-Fang;WANG Ke-Yi;WU De;LIN Rong-Xing;LU Wen-Cheng;RUAN Cai-Wen;DENG Zhuo-Hui;ZHANG Meng;SONG Tie

作者机构：广东药科大学公共卫生学院广州510315 广东省疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所广州511430 广东省疾病预防控制中心传染病预防控制所广州511430 广东省疾病预防控制中心广州511430 

基　　金：广东省医学科学技术研究基金(B2020140) 

出 版 物：《应用昆虫学报》 (Chinese Journal of Applied Entomology)

年 卷 期：2023年第60卷第1期

页      码：304-312页

摘      要：【目的】建立中华按蚊Anopheles sinensis与雷氏按蚊Anopheles lesteri实时荧光定量PCR(qPCR)检测技术,为2种传疟按蚊的准确鉴定提供分子鉴定方法。【方法】建立2种按蚊的样本库,利用形态学方法和基因测序对蚊虫样本进行鉴定;合成并克隆阳性质粒质控品。从NCBI数据库上下载中华按蚊和雷氏按蚊的rDNA-ITS2序列,利用Prime3软件在线设计2种按蚊的引物和探针,并验证该PCR方法的最低检测限、敏感性、特异性和可重复性。【结果】收集并鉴定4种383头蚊虫,其中中华按蚊159头、雷氏按蚊104头、致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus 60头和白纹伊蚊Aedes albopictus 60头。中华按蚊和雷氏按蚊的qPCR的最低检测限均为31.50拷贝/反应,标准曲线线性关系相关系数(R^(2))均为0.99。敏感性和特异性均为100%,重复性试验结果显示,中华按蚊和雷氏按蚊的组内和组间变异系数均小于2%。【结论】本方法所建立的TaqMan探针qPCR方法灵敏度高,特异性高,可用于中华按蚊和雷氏按蚊的分子鉴别。

主 题 词：中华按蚊 雷氏按蚊 TaqMan探针 实时荧光定量PCR 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.7679/j.issn.2095-1353.2023.033

馆 藏 号：203121177...