含人FABP4基因启动子荧光素酶报告质粒的构建及鉴定

作     者：朱锦灿 陈小宇 祝爱珍 刘成成 刘善淘 刘革修 ZHU Jin-can;CHEN Xiao-yu;ZHU Ai-zhen;LIU Cheng-cheng;LIU Shan-Tao;LIU Ge-xiu

作者机构：暨南大学血液病研究所广州510632 

基　　金：国家自然科学基金(81270568) 

出 版 物：《中国医科大学学报》 (Journal of China Medical University)

年 卷 期：2014年第43卷第2期

页      码：166-169页

摘      要：目的构建含有人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)基因启动子荧光素酶报告基因质粒pGL3-Basic-FABP4-promoter,为脂类代谢相关药物研究提供基础。方法根据已知人的FABP4基因启动子序列设计引物,以人DNA为模板,用PCR法扩增出人FABP4基因启动子的DNA大片段。经过限制性内切酶KpnI和XhoI双酶切后插入到pGL3-Basic载体中;测序鉴定;然后将这些重组质粒瞬时转染到K293细胞中,并在24 h后检测其荧光素酶活性。结果构建的含荧光素酶基因的质粒,经酶切及测序鉴定结果显示FABP4启动子插入的位置和序列正确。转染细胞后检测其荧光显示:重组pGL3质粒转录活性较pGL3-Basic质粒明显增强(P<0.001)。结论成功构建了pGL3-Basic-FABP4-promoter质粒,为进一步研究FABP4基因的表达调控提供了工具和基础。

主 题 词：FABP4 启动子 荧光素酶 质粒 转染 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

馆 藏 号：203121188...