口蹄疫病毒VP1蛋白病毒样颗粒表达系统的构建

作     者：窦小龙 任晓冰 魏婕 苗书魁 冉多良 马文戈 DOU Xiao-long;REN Xiao-bing;WEI Jie;MIAO Shu-kui;RAN Duo-liang;MA Wen-ge

作者机构：新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 新疆畜牧科学院兽医研究所新疆乌鲁木齐830000 

基　　金：国家自然科学基金项目(31060346) 公益性行业(农业)科研专项(201103008) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2014年第35卷第3期

页      码：11-14页

摘      要：为制备Asia 1型口蹄疫病毒（FMDV）双层结构病毒样颗粒，选择牛病毒性腹泻病毒（BVDV）流行株BVDV JZ05-1核心蛋白p14的第169～270位氨基酸和 FMDV Asia 1/JS/CHA/05结构蛋白 VP1的第1～211位氨基酸，两者之间设计柔性肽连接，人工合成 p14-柔性肽-VP1融合蛋白编码序列，全基因长990 bp。合成基因与枯草芽胞杆菌表达载体 p7257-P43连接，构建成表达质粒 p7257-P43-P14-VP1。转化枯草芽胞杆菌 WB800，经筛选、鉴定，获得表达 p14-VP1融合蛋白的枯草芽胞杆菌。该重组表达菌在含有40μg/mL氯霉素的 LB中培养后，菌体超声破碎可检测到目的蛋白。Western blot 结果显示，该蛋白能特异性识别Asia 1型FMDV抗体，具有良好的反应原性。电镜观察显示，融合蛋白组装为直径约50 nm大小的病毒样颗粒（VLP）。

主 题 词：Asia1型口蹄疫病毒 病毒样颗粒 融合蛋白 枯草芽胞杆菌 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-5038.2014.03.003

馆 藏 号：203121189...