乌腺金丝桃HaHYP1基因的克隆及原核表达

作     者：刘晓丹 王霞 隋昕 LIU Xiao-dan;WANG Xia;SUI Xin

作者机构：吉林农业科技学院吉林吉林132101 

基　　金：吉林省教育厅资助项目(JJKH20200384KJ) 吉林农业科技学院青年基金项目(吉农院合字第号) 

出 版 物：《中药材》 (Journal of Chinese Medicinal Materials)

年 卷 期：2022年第45卷第8期

页      码：1834-1838页

摘      要：目的:克隆乌腺金丝桃HaHYP1基因,并进行表达分析,为进一步探索金丝桃素生物合成的分子机制奠定基础。方法:根据已报道的金丝桃素合成酶Hyp-1同源基因设计兼并引物,利用qRT-PCR扩增金丝桃素合成酶Hyp-1基因,并进行序列分析和原核表达;同时利用qRT-PCR技术分析HaHYP1基因在不同组织部位的表达模式。结果:乌腺金丝桃HaHYP1基因的完整ORF为480 bp,编码159个氨基酸,推测的分子量为17.9 kDa,等电点为5.54。HaHYP1蛋白具有典型的P环结构和Bet v1家族特征性基序区,属于PR-10亚家族。乌腺金丝桃HaHYP1与贯叶连翘HpHYP1位于同一小的分支,表明两者亲缘关系最近。qRT-PCR检测结果表明,该基因在乌腺金丝桃叶中表达最高,其次是花和茎,根中表达最少。原核表达载体pQE-30-HaHYP1转化至大肠杆菌M15感受态细胞,在18 kDa附近表达出目的蛋白。结论:该研究为深入开展金丝桃素生物合成的分子机制和体外转化研究提供了理论依据。

主 题 词：乌腺金丝桃 金丝桃素合成酶 基因克隆 序列分析 原核表达 

学科分类：100703[100703] 1007[医学-药学类] 10[医学] 

D　O　I：10.13863/j.issn1001-4454.2022.08.009

馆 藏 号：203121229...