基因Ⅶ.2亚型新城疫病毒反转录数字PCR检测方法的建立与应用

作     者：王静静 克军宏 于晓慧 彭真奇 邢安琪 刘华雷 Wang Jingjing;Ke Junhong;Yu Xiaohui;Peng Zhenqi;Xing Anqi;Liu Hualei

作者机构：中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032 农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(南方)山东青岛266032 塔里木大学新疆阿拉尔843300 安徽农业大学安徽合肥230036 宁夏大学宁夏银川750021 

基　　金：国家重点研发计划项目(2022YFD1800600) 中国动物卫生与流行病学中心创新基金项目 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2023年第40卷第5期

页      码：82-87页

摘      要：基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)是严重危害我国家禽养殖业健康发展的主要病原之一。国家新城疫参考实验室监测表明,目前国内NDV流行毒株已由基因Ⅶ.1.1亚型转变为Ⅶ.2亚型。为实现基因Ⅶ.2亚型NDV的快速检测和精准定量,针对其国内流行毒株F基因保守区域设计了特异性引物和探针,建立了一种可快速检测基因Ⅶ.2亚型NDV的反转录数字PCR(RT-dPCR)方法,并评估了该方法的敏感性、特异性和重复性。结果显示:建立的RT-dPCR方法检测下限为1.30 copies/μL,敏感性较高;特异性强,与基因Ⅵ型、Ⅻ型NDV以及其他常见禽病病毒(禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒和禽腺病毒)无交叉反应;重复性试验变异系数为2.6%,小于3%,重复性好。利用本方法对从活禽市场采集的200份鸡口咽/泄殖腔拭子样品进行检测,发现检测结果与病毒分离鉴定结果一致。结果表明,本研究建立的RT-dPCR方法具有良好的敏感性、特异性、重复性和准确性,可用于基因Ⅶ.2亚型NDV的快速检测和精准定量,同时也为其核酸标准物质的研制奠定了基础。

主 题 词：新城疫病毒 基因Ⅶ.2亚型 反转录数字PCR 性能评估 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2023.05.016

馆 藏 号：203122143...