子宫内膜癌PTEN基因968delA突变检测技术平台的构建及初步应用

作     者：李赛 龚咏晴 向花花 董巍檑 马艳 郭紫芬 LI Sai;GONG Yongqing;XIANG Huahua;DONG Weilei;MA Yan;GUO Zifen

作者机构：南华大学衡阳医学院附属第一医院妇产科湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院药学院药物药理研究所湖南衡阳421001 

基　　金：湖南省教育厅重点项目(19A419) 

出 版 物：《临床检验杂志》 (Chinese Journal of Clinical Laboratory Science)

年 卷 期：2023年第41卷第3期

页      码：171-175页

摘      要：目的 构建子宫内膜癌PTEN基因968delA突变检测技术平台,为临床分析PTEN基因968delA突变与子宫内膜癌的相关性提供技术支持。方法 设计PTEN基因968delA位点的特异性硫化修饰引物,以本实验室前期构建的包含PTEN基因968delA位点的突变型质粒和野生型质粒为模板,进行高保真聚合酶介导的双向引物延伸反应,采用正交设计进行PCR条件优化,再将其优化后采用突变敏感性分子开关技术检测从南华大学附属第一医院收集的62例临床患者子宫内膜组织样本PTEN基因968delA位点突变。结果 突变敏感性分子开关技术检测PTEN基因968delA位点最佳PCR反应条件为:30个循环、模板DNA(10 ng/μL)0.3μL、引物(10μmol/L)0.5μL、退火温度61℃,灵敏度达10^(-3)ng/μL。62例子宫内膜癌组织与21例正常子宫内膜组织标本均未发现PTEN基因968delA突变。结论 成功构建了子宫内膜癌PTEN基因968delA突变检测技术平台,为该技术在PTEN基因968delA的突变筛查中的应用提供了依据。

主 题 词：突变敏感性分子开关 正交设计 PTEN基因 子宫内膜癌 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.13602/j.cnki.jcls.2023.03.03

馆 藏 号：203122219...